Calcolo delle diluizioni seriali in microbiologia

Autore: Sharon Miller
Data Della Creazione: 26 Gennaio 2021
Data Di Aggiornamento: 17 Maggio 2024
Anonim
Diluizioni
Video: Diluizioni

Contenuto

Le diluizioni seriali vengono utilizzate nei laboratori chimici e biologici principalmente per eseguire esperimenti. Di solito sono presentati su scale logaritmiche o multipli di 10. La maggior parte delle volte, batteri, cellule e soluti vengono diluiti per agire come controllori negli esperimenti. Le diluizioni servono ancora a fornire un alto grado di accuratezza negli esperimenti dose-risposta, in cui tutti i campioni derivano dallo stesso lotto. Inoltre, possono essere necessari per ridurre il numero di particelle in un campione da utilizzare in apparecchiature automatizzate. Le diluizioni seriali vengono completate prelevando un piccolo volume del campione originale, versandolo in una nuova bottiglia e riportandolo al volume originale con la soluzione diluita. La formula generale è: concentrazione iniziale / fattore di diluizione = nuova concentrazione. Nell'esempio riportato di seguito, calcoleremo una diluizione seriale di 10 mL da 2,5x10 ^ 7 cellule / mL a 25 cellule / mL con un fattore di diluizione di 100.


Passo 1

Indossare occhiali e guanti prima di maneggiare le sostanze.

Passo 2

Etichettare le tre provette usando il pastello come segue: 2,5 x 10 ^ 5, 2,5 x 10 ^ 3, 25 cellule / mL.

Passaggio 3

Utilizzare la formula (concentrazione cellulare originale / fattore di diluizione = nuova concentrazione) per risolvere la prima diluizione. La concentrazione originale sarà 2,5x10 ^ 7, il fattore di diluizione 100 e il risultato della nuova concentrazione di questo passaggio sarà 2,5x10 ^ 5 cellule / mL.

Passaggio 4

Diluire il campione originale a 2,5x10 ^ 7 cellule / mL per un fattore di 100. Rimuovere 1 mL della soluzione originale con la pipetta corrispondente e versare nella provetta etichettata "2,5 x 10 ^ 5 cellule / mL". Con l'altra pipetta, versare altri 99 ml di acqua nella provetta per completare la diluizione desiderata.

Passaggio 5

Diluire nuovamente le cellule di un altro fattore di 100. Rimuovere nello stesso modo di prima, ma ora con 1 ml della provetta da 2,5 x 10 ^ 5 cellule / ml all'interno della provetta etichettata "2,5 x 10 ^ 3 cellule / ml. ". Aggiungere nuovamente 99 mL di acqua a questa nuova provetta per completare la diluizione, che risulterà in 2,5 x 10 ^ 3 cellule / mL.


Passaggio 6

Diluire le cellule ora per l'ultima volta. Ripetere la stessa procedura di prima di versare nella provetta etichettata "25 cellule / mL". Aggiungere 99 mL di acqua per completare il processo e raggiungere la diluizione desiderata di 25 cellule / mL.