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La cromatografia è ampiamente utilizzata nei laboratori chimici per determinare l'identità di un componente sconosciuto. Questo componente scorre attraverso il materiale di avvolgimento della colonna e interagisce con le particelle. Le interazioni tra le particelle e i componenti nel campione si basano sull'attrazione o la solubilità tra di loro. Le molecole che non hanno interazione con le particelle del materiale della guaina possono attraversarlo senza ostacoli. Il tempo necessario affinché le molecole passino dal punto di iniezione al sistema al picco massimo di una molecola non reattiva è il tempo morto della colonna.
Passo 1
Rafforzare il campione sconosciuto con una piccola quantità di un composto che non viene trattenuto dal materiale della colonna. Il composto passerà attraverso la colonna senza interagire con il materiale di avvolgimento nella colonna.
Passo 2
Caricare la siringa con circa 20 microlitri del campione e inserire l'ago della siringa nella porta di iniezione. Caricare il loop del campione dalla valvola svuotando la siringa nella valvola.
Passaggio 3
Accendere lo strumento cromatografico e avviare la fase mobile. Questa fase scorre attraverso lo strumento e porta il campione attraverso la colonna e il rivelatore che termina in un recipiente per rifiuti.
Passaggio 4
Attivare la valvola, che consente al campione di entrare nel percorso del flusso del fluido. Questo carica i componenti del campione nella parte superiore della colonna e inizia la separazione.
Passaggio 5
Monitorare il segnale dell'emettitore del rilevatore e identificare il primo picco nel cromatografo. La differenza tra il tempo di iniezione e il massimo del primo picco, rappresentato dalla componente di rinforzo, è il tempo morto.
Passaggio 6
Misurare la distanza tra il punto di iniezione e l'altezza massima del primo picco. Moltiplica la distanza per la velocità della carta o dell'asse per trovare il tempo morto.