Contenuto
- indicazioni
- Preparazione dell'estratto di patate
- Preparare la miscela
- sterilizzazione
- Versando il composto
- suggerimenti
- avvertimento
- Cosa ti serve
Agar destrosio patata (BDA) è un mezzo semisolido buono usato per creare funghi. Viene anche spesso usato per isolare, coltivare e mantenere in formazione le specie di funghi. È possibile acquistare piatti di Petri pronti o tubi contenenti BDA, oppure il BDA può essere fatto rapidamente utilizzando un premix commerciale. Tuttavia, non è difficile realizzare una versione semplice ed efficace a basso costo.
indicazioni
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Mettere le patate in una padella con circa 1,2 litri di acqua del rubinetto e cuocere a fuoco lento per un'ora.
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Togliere la padella dal fuoco e raffreddare il liquido fino a quando non può essere gestito comodamente (circa dieci minuti).
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Versare l'estratto di patata liquida attraverso un filtro o una garza e raccoglierlo in un altro contenitore.
Preparazione dell'estratto di patate
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Aggiungere destrosio e agar a un litro di acqua estratto di patate.
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Testare il pH della soluzione con carta pH tester o pH-metro.
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Se il pH è superiore a 6,5, ridurlo aggiungendo una goccia della soluzione di acido cloridrico ogni volta e facendo un altro test.
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Se il pH è inferiore a 6, regolarlo aggiungendo una goccia di soluzione di idrossido di sodio alla volta e eseguendo un nuovo test.
Preparare la miscela
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Mescolare bene e dividere in lotti più piccoli di 250 millilitri. Versare in quattro flaconcini da 500 ml (ogni flaconcino deve essere mezzo pieno per non far bollire).
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Ricarica ogni flaconcino con un foglio di alluminio piegato liberamente, in modo che il film non cada, ma non sia completamente sigillato.
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Metti i barattoli in una pentola a pressione.
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Azionare la pentola a pressione seguendo le istruzioni del produttore per la sterilizzazione del BDA a 121 ° C a 15 psi per 15 minuti.
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Spegnere la pentola a pressione e lasciarla tornare alla pressione atmosferica, quindi rimuovere le fiale e lasciarle raffreddare fino a quando non possono essere maneggiate.
sterilizzazione
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Allineare le piastre di Petri su una superficie piana.
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Una volta che i flaconcini sono stati raffreddati alla temperatura di manipolazione ma prima che il terreno inizi a solidificarsi, tenere la fiala con una mano e rimuovere la pellicola con l'altra mano.
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Per ogni capsula di Petri, rimuovere il coperchio con una mano, riempire rapidamente metà con liquido BDA e sostituire il coperchio.
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Ripetere il passaggio 3 sopra finché tutte le piastre di Petri sono state riempite.
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Se è rimasto un BDA, recuperare il flacone con il coperchio originale della lamina, lasciare raffreddare e solidificare, serrare il coperchio in alluminio e conservarlo in frigorifero.
Versando il composto
suggerimenti
- La maggior parte dei funghi cresce bene in condizioni leggermente acide, pertanto il valore finale del pH dovrebbe essere compreso tra 6 e 6,5, sebbene possa essere adattato a qualsiasi pH richiesto per una specie specifica.
- Lascia che le coperture della capsula di Petri si aprano quanto basta per consentire alla miscela di essere versata e coperta il più velocemente possibile.
- Ci vuole pratica per guadagnare velocità ed efficienza nello sversamento di agar in piastre di Petri.
- Dopo il raffreddamento e la solidificazione, i piatti BDA possono essere avvolti in plastica e conservati in frigorifero per mesi.
- La maggior parte dell'acqua di rubinetto contiene minerali utili alla crescita dei funghi, tuttavia, se l'acqua locale ha concentrazioni di minerali estremi o un pH molto alto o basso, sostituirlo con acqua distillata.
avvertimento
- Seguire tutte le istruzioni operative e di sicurezza per la pentola a pressione da utilizzare.
- Lasciare i tappi di bottiglia allentati quando si sterilizza la pentola a pressione per evitare una sovrapressurizzazione.
- Indossare guanti resistenti al calore quando si maneggiano contenitori caldi.
- Indossare occhiali di sicurezza quando si utilizza la pentola a pressione quando si rimuove il BDA sterile e durante il getto.
Cosa ti serve
- 300 g di patate sbucciate e tagliate
- padella
- Colino da cucina
- Tester PH o pH-metro
- 1 molare di acido cloridrico
- 1 molare di idrossido di sodio
- 4 flaconcini di vetro Ehrlenmayer da 500 ml (o altri contenitori autoclavabili a bocca stretta)
- 10 g di destrosio (glucosio) in polvere
- 20 g di agar
- Foglio di alluminio
- Pentola a pressione
- Capsule di Petri sterili