Contenuto
La cromatografia è un metodo per separare le sostanze. Viene implementato utilizzando un tubo stretto (colonna) riempito con un materiale specifico. Una miscela di composti viene forzata attraverso la colonna mediante pressione. Ogni composto lascia la colonna durante determinati intervalli, rappresentando graficamente un picco in un cromatogramma. La posizione del picco massimo, denominato tempo di ritenzione, è specifica per ogni composto. Le prestazioni delle colonne cromatografiche sono espresse come numero di piatti teorici. Un piatto teorico è uno strato immaginario all'interno di una colonna che aiuta a interpretare il processo di separazione. Un maggior numero di piatti teorici corrisponde ad una migliore efficienza della colonna.
Passo 1
Ottieni un grafico di un cromatogramma dalla tua colonna cromatografica.
Passo 2
Disegna una linea verticale dal picco massimo alla linea di base.
Passaggio 3
Misura la lunghezza di quella linea e dividila per 2 per trovare il suo centro. In questi passaggi, registrare tutte le misurazioni in millimetri (mm).
Passaggio 4
Disegna una linea che attraversi il centro della linea, parallela all'asse orizzontale.
Passaggio 5
Misurare la lunghezza della linea nel passaggio 4 per ottenere la larghezza del picco a metà altezza. Ad esempio, la larghezza del picco è di 12 mm.
Passaggio 6
Misurare la distanza da 0 al picco massimo per ottenere il tempo di ritenzione. Ad esempio, il tempo di ritenzione è di 650 mm. Si noti che il tempo di ritenzione è solitamente espresso in minuti, ma è anche proporzionale alla lunghezza misurata.
Passaggio 7
Dividere il tempo di ritenzione per l'ampiezza del picco e quadrare il coefficiente. Quindi, moltiplica il risultato per 5,55 per calcolare il numero di piatti teorici:
Numero di piatti teorici = 5,55 * (Tempo di ritenzione / Larghezza del picco) ^ 2
Nel nostro esempio, sarebbe 5,55 * (650 mm / 12 mm) ^ 2 = 16.284 piatti teorici. Il risultato viene arrotondato al numero intero più vicino.