Come preparare una soluzione tampone fosfato di potassio

Contenuto

• indicazioni
• avvertimento
• Cosa ti serve

Molte ricerche richiedono soluzioni tampone, che vengono utilizzate per lavare le cellule e consentire loro di eseguire reazioni chimiche. La soluzione standard trovata in molti laboratori è la soluzione tampone fosfato di potassio, che è ottenuta combinando fosfato e potassio con acqua. Come con qualsiasi soluzione tampone, la chiave è conoscere le quantità corrette di ciascun ingrediente in modo che la soluzione di lavoro abbia la giusta concentrazione. Tutte le soluzioni tampone devono essere sterilizzate in autoclave prima di essere conservate a temperatura ambiente.

indicazioni

È possibile preparare uno stock di tampone fosfato di potassio da avere in laboratorio (immagine chimica di David Hughes da Fotolia.com)

1. Versare 500 ml di acqua distillata in un matraccio tarato sterile.

2. Aggiungere 434 ml di fosfato di potassio monobasico 0,2 M. Usare l'asta di vetro per mescolare.

3. Aggiungere 66 ml di fosfato di potassio dibasico 0,2 M e agitare con il bastoncino.

4. Collocare la fiala con la soluzione tampone fosfato di potassio in una bacinella metallica per raccogliere la flebo e posizionare un pezzo di nastro in autoclave sulla parte esterna della fiala. Regolare l'autoclave per operare per 15 minuti. Controllare il nastro per assicurarsi che abbia cambiato colore, il che indica che l'operazione dell'autoclave è stata eseguita correttamente.

   
   

5. Metti un tappo sterile sul flaconcino e conservalo a temperatura ambiente.

avvertimento

• Quando si rimuove la soluzione del buffer dell'autoclave, sarà caldo. Indossare guanti termici per evitare ustioni.

Cosa ti serve

• 500 ml di acqua distillata
• Pallone volumetrico sterile con coperchio
• 434 ml di fosfato di potassio monobasico 0,2 M
• 66 ml di fosfato di potassio dibasico 0,2 M
• Bacchetta di vetro
• Macchina per autoclave
• Nastro autoclave